峰型問(wèn)題是液相色譜儀的主要問(wèn)題，在做液相分析過(guò)程中，我們就是要變換不同的條件來(lái)改變不好的峰型，對(duì)于樣品的異常峰，要區(qū)別對(duì)待，從主要問(wèn)題出發(fā)，一個(gè)一個(gè)加以解決。
1、色譜圖中未出峰 系統(tǒng)未進(jìn)樣或樣品分解;泵未輸液或流動(dòng)相使用不正確;檢測(cè)器設(shè)置不正確;針對(duì)以上情況成因作相應(yīng)調(diào)整。
2、一個(gè)峰或幾個(gè)峰是負(fù)峰 流動(dòng)相吸收本底高;進(jìn)樣過(guò)程中進(jìn)入空氣;樣品組分的吸收低于流動(dòng)相。
3、出的峰均為負(fù)峰 信號(hào)電纜接反或檢測(cè)器輸出及性設(shè)置顛倒;光學(xué)裝置尚未達(dá)到平衡。
4、出的峰均為寬峰 系統(tǒng)未達(dá)到平衡;溶解樣品的溶劑及性比流動(dòng)相差很多;色譜柱尺寸及類型選擇不正確;色譜柱或保護(hù)柱被污染或柱效低了;溫度變化造成的影響。
5、所出峰比預(yù)想的小 樣品黏度過(guò)大;進(jìn)樣品故障或進(jìn)樣體積誤差;檢測(cè)器設(shè)置不正確.定量環(huán)體積不正確;檢測(cè)池污染;檢測(cè)器燈出現(xiàn)問(wèn)題。
6、出現(xiàn)倆峰或肩峰 進(jìn)樣量過(guò)大;樣品濃度過(guò)高;保護(hù)柱或色譜柱柱頭堵塞;保護(hù)拄或色譜柱污染或失效;柱塌陷或形成短通道。
7、前伸峰：進(jìn)樣量或樣品濃度高，溶解樣品的溶劑較流動(dòng)相多;保護(hù)柱或色譜柱污染或失效。
①柱溫低：升高柱溫;②樣品溶劑選擇不恰當(dāng)：使用流動(dòng)相作為樣品溶劑;③樣品過(guò)載：減少樣品含量;④色譜柱損壞：換柱子。
8、拖尾峰：柱過(guò)載，減少樣品量;增加柱直徑采用較高容量的固定相;峰干擾，對(duì)樣品進(jìn)行清潔過(guò)濾;調(diào)整流動(dòng)相;硅羥基作用，加入三乙胺，用堿致鈍化柱增加緩沖液或鹽的濃度減少流動(dòng)相pH值;柱內(nèi)燒結(jié)不銹鋼失效，換燒結(jié)不銹鋼;加在線過(guò)濾器，對(duì)樣品進(jìn)行過(guò)濾;死體積或柱外體積過(guò)大，將連接點(diǎn)改低;盡可能使用內(nèi)徑較細(xì)的連接管;柱效下降，換柱子;采用保護(hù)柱，對(duì)柱子進(jìn)行老化。
9、出現(xiàn)平頭峰 檢測(cè)器設(shè)置不正確;進(jìn)樣體積太大或樣品濃度太高。
10、出現(xiàn)多峰 進(jìn)樣閥殘余峰，可能為上次樣品的殘余。在每次進(jìn)完樣后用時(shí)間來(lái)平衡和清洗系統(tǒng);樣品中存在未知物，改進(jìn)樣品的預(yù)處理;流動(dòng)相污染，換流動(dòng)相，盡可能現(xiàn)配現(xiàn)用，隔夜的流動(dòng)相再次使用時(shí)要過(guò)濾;盡可能使用HPLC試劑;流路中有小的氣泡，打開Purge閥，加快流速。
11、峰分叉 ①保護(hù)柱或分析柱污染：取下保護(hù)柱再進(jìn)行分析,如果不行換保護(hù)柱。如果分析柱阻塞,拆下來(lái)清洗。如果問(wèn)題仍然存在,可能是柱子被強(qiáng)保留物質(zhì)污染,運(yùn)用適當(dāng)?shù)拇胧?。如果?wèn)題仍然存在,入口可能被阻塞,換篩板或換色譜柱。②樣品溶劑不溶于流動(dòng)相改變樣品溶劑,如果可能采取流動(dòng)相作為樣品溶劑。
12、峰變形 樣品過(guò)載，減少樣品載量。
13、早出的峰變形 樣品溶劑選擇不恰當(dāng) ①減少進(jìn)樣體積 ②運(yùn)用低及性樣品溶劑
14、早出的峰拖尾程度大于晚出的峰 柱外效應(yīng) ①調(diào)整系統(tǒng)連接(使用短、內(nèi)徑小的管路)
②使用小體積的流通池
15、酸性或堿性化合物的峰拖尾 緩沖不適合①使用濃度50～100 mM的緩沖液②使用等于流動(dòng)相pH值的緩沖液
16、額外的峰 (1)樣品中有其他組分：正?，F(xiàn)象;(2)、進(jìn)樣的洗脫峰：①增加運(yùn)行時(shí)間或梯度斜率②增加流速;(3)空位或峰：①檢查流動(dòng)相是否干凈 ②使用流動(dòng)相作為樣品溶劑 ③減少進(jìn)樣體積。