淺析凝膠色譜法分類及原理
凝膠色譜法原理
凝膠色譜法又稱體積排阻色譜法，使用水溶液流動(dòng)相的稱為凝膠過(guò)濾色譜，使用有機(jī)溶劑流動(dòng)相的稱為凝膠滲透色譜。凝膠色譜的固定相是多孔物質(zhì)，如多孔凝膠、交聯(lián)聚苯乙烯、多孔玻璃及多孔硅膠等。試樣是按照其中各組分分子大小的不同而分離的。大于填料微孔的分子，由于不能進(jìn)入填料微孔，而直接通過(guò)柱子，Z先流出柱外，在色譜圖上Z早出現(xiàn)，小于填料微孔的組分分子，可以滲透到微孔中不同的深度，相對(duì)分子質(zhì)量Z小的組分，保留時(shí)間Z長(zhǎng)。
凝膠色譜與凝膠層析是否一樣？
基本上是一致的只是固定相存在差異。凝膠色譜法又稱分子排阻色譜法。凝膠色譜主要用于高聚物的相對(duì)分子質(zhì)量分級(jí)分析以及相對(duì)分子質(zhì)量分布測(cè)試。
凝膠層析又稱分子篩過(guò)濾、排阻層析，操作條件比較溫和，可在相當(dāng)廣的溫度范圍下進(jìn)行，并且對(duì)分離成分理化性質(zhì)的保持有獨(dú)到之處。
兩者的共同點(diǎn)是都不需要有機(jī)溶劑。凝膠色譜色譜一般用在HPLC等分析場(chǎng)合。而凝膠層析一般用在制備的時(shí)候。
凝膠凈化柱和凝膠色譜柱是一回事嗎?
原理是一回事，都是排阻色譜。 但是前者是制備柱，對(duì)大量樣品進(jìn)行分離，柱子口徑大，一般要有切割承樣的尾接裝置；后者是分析柱，主要目的是對(duì)小量樣品進(jìn)行分析，柱子直徑小，一般還有柱溫箱，對(duì)泵的穩(wěn)定性要求高，必須接檢測(cè)器。
根據(jù)分離的對(duì)象是水溶性的化合物還是有機(jī)溶劑可溶物，又可分為凝膠過(guò)濾色譜（GFC）和凝膠滲透色譜（GPC）。
凝膠過(guò)濾色譜：
凝膠過(guò)濾色譜一般用于分離水溶性的大分子，如多糖類化合物。凝膠的代表是葡萄糖系列，洗脫溶劑主要是水。
凝膠滲透色譜：
凝膠滲透色譜法主要用于有機(jī)溶劑中可溶的高聚物(聚苯乙烯、聚氯已烯、聚乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯等)相對(duì)分子質(zhì)量分布分析及分離，常用的凝膠為交聯(lián)聚苯乙烯凝膠，洗脫溶劑為四氫呋喃等有機(jī)溶劑。
凝膠色譜不但可以用于分離測(cè)定高聚物的相對(duì)分子質(zhì)量和相對(duì)分子質(zhì)量分布，同時(shí)根據(jù)所用凝膠填料不同，可分離油溶性和水溶性物質(zhì)，分離相對(duì)分子質(zhì)量的范圍從幾百萬(wàn)到100以下。
近年來(lái)，凝膠色譜也廣泛用于分離小分子化合物?；瘜W(xué)結(jié)構(gòu)不同但相對(duì)分子質(zhì)量相近的物質(zhì)，不可能通過(guò)凝膠色譜法達(dá)到完全的分離純化的目的。
